BB娱乐平台登录艾弗森八爪鱼状DNA纳米结构和氧化石墨烯增强乙肝病毒DN

　　1）构建了一种基于八爪鱼状的DNA纳米结构(ODN)和氧化石墨烯（GO）共同增强荧光各向异性的新策略。

　　（2）利用ODN的刚性结构来间隔染料和GO的距离，避免GO猝灭荧光，提高了检测的准确性。此外，由于ODN的体积大，靶物竞争的空间位阻降低，提高了反应的灵敏度。

　　（3）同时ODN利用六个poly-A20牢牢吸附在GO上，提高了该方法在复杂样品检测中的抗干扰能力。

　　荧光各向异性（FA）是一种基于分子旋转的生物传感方法。它是一种比率测量法，反映了荧光基团的固有特性，如尺寸、旋转速度和寿命。与其他荧光分析方法相比，荧光各向异性法对强度波动和光漂白的敏感性较低，已广泛应用于蛋白质、金属离子、小分子、核酸分子等多种靶标的检测，同时它也被用于探究物质之间的相互作用。然而，大多数方法受到目标分子质量小的限制，导致检测灵敏度有限。因此，选择合适的FA增强材料，构建具有较高灵敏度的FA检测方法是十分有意义的。

　　在此工作中，作者建立了一种新型的FA放大策略。该策略以DNA四面体为骨架，将其设计为八爪鱼形状的DNA纳米结构（ODN），并结合氧化石墨烯（GO）同时增强ssDNA的荧光各向异性值(r)，用于灵敏检测乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）。

　　如图1所示，作者用4条DNA单链S1、S2、S3和S4自组装形成ODN。同时，S1的部分序列被设计为捕获DNA (cDNA)，能与探针DNA（pDNA）杂交，其余的DNA通过p-p堆积作用使ODN吸附在GO上。在没有HBV-DNA时，羧基四甲基罗丹明（TAMRA）修饰的pDNA与cDNA通过碱基互补配对杂交。同时，ODN通过6个poly-A20与GO结合，形成ODN-GO复合物。因此，TAMRA的旋转受到较大质量的GO和ODN的同时限制，得到较高的r值。加入HBV-DNA后，HBV-DNA通过立足点介导的链交换反应与pDNA杂交形成双链(dsDNA)结构，离开ODN和GO表面。此时，由于dsDNA的质量较小，在溶液中旋转速度快，TAMRA的FA值较低。因此，通过显著降低的FA值可实现HBV-DNA的灵敏检测。

　　首先，用12%聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）证实了ODN的形成。此外，利用原子力显微镜对GO和ODN-GO进行了表征，证实了ODN-GO的成功构建。

　　接着作者验证了该方法的可行性，证实了只能当GO和ODN同时存在时，Δr/r0最大。ODN-GO增强的Δr/r0值比单独使用ssDNA约高2.5倍，比单独使用GO约高2倍。作者也证实ODN具有较强的刚性结构和较高的增强FA的能力。

　　最后，在最佳的实验条件下，Δr/r0与HBV-DNA在1 nM-50 nM浓度范围内呈良好的线），其中c为HBV-DNA浓度（单位为nmol/L）。检测限（LOD）为330 pM (3σ/k)。相较于只有GO增强和只有ODN增强的FA策略，作者提出的方法具有更高的灵敏度。